اختبار فيروس نقص المناعة البشرية توقيت الجيل الرابع. فك رموز نتائج تحليل فيروس نقص المناعة البشرية ، تحديث الإيدز مؤخرا! اختبار ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية: توقيت الاختبار
في معظم دول العالم ، يعتمد اختبار السكان بحثًا عن فيروس نقص المناعة البشرية على اكتشاف الأجسام المضادة للفيروس. هناك العديد من الطرق لاكتشاف هذه الأجسام المضادة ، ولكن اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) هو الأكثر استخدامًا. قام نيكولاي نيدزلسكي ، رئيس تحرير بوابة AIDS.ru ، بتحليل ميزات الأجيال المختلفة من اختبارات ELISA.
أي شخص يحاول معرفة ما إذا كان مصابًا بفيروس نقص المناعة البشرية يتلقى إجابة لا لبس فيها من كل من المصادر الوطنية والأجنبية - لذلك من الضروري اختبار وجود الأجسام المضادة للفيروس. ولكن بمجرد أن يبدأ الشخص في الغوص في المعلومات حول الاختبار بمزيد من التفصيل ، يبدأ في الخلط بينه وبين ذلك ، حيث يبدأ المتخصصون المختلفون في الرجوع إلى مصادر مختلفة ، يتناقضون مع بعضهم البعض. يؤدي هذا إلى الشعور بأن المتخصصين أنفسهم لا يفهمون سوى القليل عن تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. كما قد تتخيل ، هذا ليس هو الحال حقًا ، ففي ما يقرب من ثلاثة عقود من تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية ، تم إحراز تقدم كبير من خلال تطوير وإدخال تقنيات جديدة. على مر السنين ، تم إنشاء أربعة أجيال من أنظمة الاختبار ، والتي حلت محل بعضها البعض. لقد أتاح التقدم في التشخيص إمكانية تبسيط عملية الاختبار مع كل جيل ، وجعلها آلية ، وبالتالي تقليل "العامل البشري" ، وكذلك زيادة موثوقية النتيجة في تاريخ سابق. لسوء الحظ ، فإن توصيات الاختبارات الوطنية ، بالإضافة إلى معرفة الممارسين العامين والمتخصصين في أخذ عينات الدم ، غالبًا ما تتخلف عن التقدم وتستند إلى بيانات قديمة. هذا هو بالتحديد السبب الرئيسي للارتباك في آراء العاملين في المجال الطبي الذي يعبرون عنه أثناء فحص المرضى ، أو في منشوراتهم. في هذه المادة ، سأحاول تنظيم جميع البيانات الخاصة بالاختبار بواسطة ELISA حتى يتمكن الجميع من تحديد النقاط كل "أنا" لأنفسهم ". في بعض البلدان ، على سبيل المثال ، روسيا والمملكة المتحدة ، يتم توفير الوصول على نطاق واسع لاختبار السكان باستخدام أنظمة اختبار الجيل الرابع على المستوى الوطني ، وفي هذه البلدان فقط في منشآت متكررة ، ومن ثم نادرًا جدًا ، عند الاختبار بالنسبة لفيروس نقص المناعة البشرية ، قد يواجه المرء أنظمة اختبار أقدم. ولكن في العديد من دول العالم ، لا تزال أنظمة الاختبار من الجيل الثالث مستخدمة على نطاق واسع ، على سبيل المثال ، في الولايات المتحدة الأمريكية ، على الرغم من أن الوضع يتغير كل عام ، وفي كثير من الأحيان يتم تسجيل هذا النوع من أنظمة الاختبار في التاريخ. أود أن ألفت انتباهكم إلى حقيقة أنه عند دراسة مصادر مختلفة ، لم أتمكن من العثور على معلومات تحتوي على معلومات حول استخدام أنظمة الاختبار للجيل الأول والثاني في عصرنا. بغض النظر عن هذا ، قررت أن أخبركم عن كل أنظمة الاختبار هذه ، الحديثة منها والتي أصبحت بالفعل من الماضي.
الاختبارات التي أصبحت من الماضي
تحدد أنظمة الاختبار للأجيال الأولى والثانية والثالثة فقط وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية. تعمل معظم هذه الاختبارات عن طريق المقايسة المناعية للإنزيم (ELISA). بالنظر إلى أن اختبار ELISA لا يحدد الفيروس نفسه ، ولكن الأجسام المضادة له ، فإن هذا النهج يسمى "الاختبار غير المباشر". تخلت العديد من البلدان بالفعل عن استخدام أنظمة الاختبار التي تكتشف فقط وجود الأجسام المضادة وتحولت إلى أنظمة اختبار الجيل الرابع [انظر أدناه ، - تقريبًا. AIDS.ru] ، والتي تستند أيضًا إلى ELISA ، ولكن في نفس الوقت ، بالإضافة إلى الأجسام المضادة ، يمكنهم اكتشاف وجود مستضد p24. في عام 1985 ، بعد عامين فقط من اكتشاف فيروس نقص المناعة البشرية ، تم تطوير أول أنظمة اختبار ELISA. يستخدمون فيروسات مفلسة أو صوتية للكشف عن الأجسام المضادة ، وهذا هو السبب في تسميتها lysates. مكنت أنظمة الاختبار هذه لأول مرة من تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، مما يمثل علامة فارقة في تاريخ مكافحة الإيدز. لم تكن خصوصية أنظمة الاختبار للجيل الأول عالية
حساسية و خصوصية ، كما جعل من الممكن تحديد وجود الأجسام المضادة فقط لفيروس نقص المناعة البشرية 1. الجيل الثاني من أنظمة الاختبار قادرة على اكتشاف الأجسام المضادة لكل من HIV1 و HIV2 ، نظرًا لأنها مؤتلفة و / أو ببتيد. في الحالة الأولى ، يتم استخدام نظائر البروتين المعدلة وراثيًا لبعض مستضدات البروتين للفيروس ، وفي الحالة الثانية ، يتم استخدام شظايا البروتين المركب كيميائيًا. أصبح هذا الجيل من الاختبارات متاحًا في أواخر الثمانينيات من القرن الماضي.أنظمة اختبار الجيل الثالث حساسة للغاية ، لأنها تستند إلى مبدأ التفاعل المحدد بين مولد الضد والجسم المضاد المقابل له. تتمثل إحدى ميزات هذه الأنواع من الاختبارات في القدرة على اكتشاف الأجسام المضادة IgM و IgG ، مما يقلل بشكل كبير من "فترة النافذة"."فترة النافذة" لهذه الأنواع من أنظمة الاختبار
يقدم باحثون مختلفون بيانات مختلفة تمامًا عن مدة "فترة النافذة" ، أي عن التوقيت الذي تكون فيه أنظمة اختبار الجيل الثالث قادرة على اكتشاف وجود الفيروس في الدم بعد لحظة انتقال الفيروس:- ثلاثة (21 يومًا) إلى ستة أسابيع (42 يومًا) [دراسة - أحدث ما توصلت إليه التكنولوجيا لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. المؤلف - Branson BM، 2007. تم النشر - Clin Infect Dis 45: S221-225].
- من أسبوعين إلى ثمانية أسابيع (متوسط 25 يومًا) ، مع تطوير 97٪ من الأشخاص للأجسام المضادة في غضون ثلاثة أشهر [غير متوفر في الدراسة].
- بعد 20-25 يومًا [دراسة - التشخيص المختبري السريري لفيروس HIV-1 واستخدام الحمض النووي الريبي الفيروسي لرصد العدوى. بقلم كومبس آر دبليو ، 2008. تم النشر بواسطة In Holmes KK (محرر) ، الأمراض المنقولة جنسياً. نيويورك: ماكجرو هيل].
- بعد 22 يومًا [بحث - تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. المؤلف - Maldarelli F ، 2004. نُشر - في مبادئ وممارسات ماندل ودوغلاس وبينيت للأمراض المعدية (الطبعة السادسة) فيلادلفيا: إلسفير تشرشل ليفينجستون.
- بعد شهر واحد [دراسة - نحو تشخيص خالي من الأخطاء لفيروس نقص المناعة البشرية: مبادئ توجيهية حول الممارسة المختبرية. المؤلف - Parry JV وآخرون ، 2003. تم النشر - Comm Dis Pub Health 6: 334-350].
الاختبارات الحديثة (اختبار أنظمة الجيل الرابع)
بدأ استخدام أنظمة اختبار الجيل الرابع في أواخر التسعينيات. تعتمد أنظمة الاختبار هذه أيضًا على طريقة ELISA ، وهي في الواقع نفس أنظمة اختبار الجيل الثالث ، لكن لديها ميزة واحدة - القدرة على اكتشاف مستضد p24. غالبًا ما يشار إلى هذه المقايسات بالمقايسات المركبة ولديها دائمًا "Ag / Ab" في اسمها ، مما يشير إلى قدرة الاختبار على اكتشاف كل من المستضد والأجسام المضادة. أيضًا ، بعض أنظمة اختبار الجيل الرابع قادرة على اكتشاف HIV-2 ، والسلالات النادرة من HIV-1 ، مثل النوع الفرعي O. يسمح لك تحديد مستضد p24 بتحديد وجود فيروس نقص المناعة البشرية حتى قبل إنتاج الأجسام المضادة ، مما يقلل "فترة النافذة" ويجعل من الممكن اكتشاف الفيروس في المراحل الحادة من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. في الوقت نفسه ، مع وجود نتيجة إيجابية ، لا تُظهر جميع الاختبارات ما تم اكتشافه بالضبط - الأجسام المضادة أو المستضد ، لذلك ، على الرغم من أن أنظمة الاختبار قادرة على اكتشاف فيروس نقص المناعة البشرية في المرحلة الأولية ، فمن المستحيل تحديد المدة التي مضى على انتقال الفيروس بمساعدتهم. كقاعدة عامة ، بالنسبة لأنظمة الاختبار للأجيال الرابعة ، يتم استخدام الدم كمادة اختبار ، على الرغم من إمكانية استخدام اللعاب في بعض أنواع الاختبارات. على الرغم من استخدام اللعاب أحيانًا كمادة في الولايات المتحدة ، إلا أن أسلوب الاختبار هذا لا يوصى به رسميًا في مسح سكاني [دراسة - الخوارزميات البديلة لتشخيص عدوى فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام الاختبارات المرخصة في الولايات المتحدة. بواسطة Owen SM وآخرون ، 2008. تم النشر بواسطة J Clin Microbiol 46: 1588-1595].
"فترة النافذة" لهذا النوع من أنظمة الاختبار
يقلل اكتشاف المستضد "فترة النافذة" بحوالي خمسة أيام مقارنة بأنظمة اختبار الجيل الثالث. تعطي المؤسسات العلمية المختلفة تقديرات مختلفة قليلاً عن مدة "الفترة الزمنية" بين تغلغل الفيروس في الجسم وقدرة أنظمة اختبار الجيل الرابع على تحديد ذلك:- 11 إلى 16 يومًا [دراسة - التشخيص المختبري السريري لـ HIV-1 واستخدام الحمض النووي الريبي الفيروسي لرصد العدوى. المؤلف - Coombs RW ، 2008. منشور - الأمراض المنقولة جنسيا. نيويورك: ماكجرو هيل].
- بعد 14 يومًا [دراسة - تقييم حساسية وخصوصية ستة فحوصات لمستضد p24 والأجسام المضادة لفيروس العوز المناعي البشري. بواسطة Ly TD وآخرون ، 2004. تم النشر - J Virol Methods 122: 185-94].
- بعد 16 يومًا [بحث - تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. المؤلف - Maldarelli F ، 2004. نُشر - في مبادئ وممارسات ماندل ودوغلاس وبينيت للأمراض المعدية (الطبعة السادسة) فيلادلفيا: إلسفير تشرشل ليفينغستون].
- ما يقرب من أسبوعين ونصف الأسبوع [دراسة - أحدث ما توصلت إليه التكنولوجيا لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. المؤلف - Branson BM، 2007. تم النشر - Clin Infect Dis 45: S221-225].
- ثلاثة إلى أربعة أسابيع بعد انتقال الفيروس [دراسة - نحو تشخيص خالي من الأخطاء لفيروس نقص المناعة البشرية: إرشادات حول الممارسة المختبرية. المؤلف - Parry JV وآخرون ، 2003. تم النشر - Comm Dis Pub Health 6: 334-350].
- بين 24 و 26 يومًا بعد انتقال الفيروس [Study - Depistage de l "Infection par le VIH en France: Modalites de realisation des tests de depistage، argaire. المؤلف - Haute Autorite de sante، 2008. تم النشر - www.has-sante .fr].
- بعد شهر واحد [دراسة - المبادئ التوجيهية الوطنية البريطانية لاختبار فيروس نقص المناعة البشرية. المؤلف - BHIVA and BIS ، 2008. نُشر - متاح على الإنترنت على www.bhiva.org].
نتائج خاطئة
عادةً ما تكون النتائج السلبية الكاذبة ممكنة فقط عند إجراء الاختبار بعد وقت قصير من انتقال الفيروس ، وأحيانًا عندما لا يكون الاختبار حساسًا بدرجة كافية لسلالات فيروس نقص المناعة البشرية النادرة. تشير الدراسات التي أجرتها الشركات المصنعة لأنظمة الاختبار إلى وجود احتمال ضئيل للنتائج الإيجابية الخاطئة. هذا لا علاقة له بمن يتم اختباره ، ولكنه يعتمد على الأدوية التي يتناولونها والتطعيمات التي تلقوها. [بحث - تشخيص عدوى فيروس نقص المناعة البشرية. المؤلف - Maldarelli F ، 2004. نُشر - في مبادئ وممارسات ماندل ودوغلاس وبينيت للأمراض المعدية (الطبعة السادسة) فيلادلفيا: إلسفير تشرشل ليفينغستون]. من سمات نظام اختبار الجيل الرابع أنه في حالات نادرة جدًا ، قد يعطي الاختبار نتيجة سلبية خاطئة ، ويرجع ذلك إلى مستوى مستضد p24 ، والذي يبدأ في الانخفاض بعد حوالي شهر من انتقال الفيروس ، وعادة ما يتم اكتشاف الأجسام المضادة خلال هذه الفترة الزمنية ، وفي حالات نادرة جدًا ، فإن p24 قد لا يتم اكتشاف المستضد حتى اللحظة التي تكون فيها الاختبارات الذاتية لمستضد p24 أكثر حساسية من الاختبارات المركبة ، لذلك من المرجح أن يكونوا قادرين على اكتشاف عدوى فيروس العوز المناعي البشري خلال هذه الفترة الزمنية [دراسة - فحص مختلط يكتشف كلا من فيروس نقص المناعة البشرية (HIV) تفتح الأجسام المضادة للمستضد p24 والأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية نافذة تشخيصية ثانية بواسطة Speers D et al. ، 2005. تم النشر - J Clin Microbiol 43: 5397-5399 ؛ البحث - هل يمكن لمقايسات مستضد p24 والأجسام المضادة المدمجة الجديدة لفيروس نقص المناعة البشرية أن تحل محل مقايسات مستضد p24 المحددة؟ المؤلف - Ly TD وآخرون ، 2007. تم النشر - طرق J Virol 143: 86-94 ؛ دراسة - تقييم حساسية ونوعية ستة فحوصات لمستضد p24 والأجسام المضادة لفيروس العوز المناعي البشري. المؤلف - Ly TD وآخرون ، 2004. تم النشر - طرق J Virol 122: 185-94].دقة أنظمة الاختبار في هذه الفئة
وجدت دراسة بريطانية أجريت على عشرة مجموعات اختبار من الجيل الرابع أن جميعها باستثناء واحدة كانت حساسة بنسبة 100٪. بعبارة أخرى ، من بين جميع الذين شملهم الاستطلاع ، تم تحديد جميع حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. في إحدى الدراسات ، لم يكشف نظام الاختبار (تركيبة Abbott Murex HIV Ag / Ab) عن حالة واحدة من حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية (من أصل 508 اختبارات). لم يتمكن الاختبار من الكشف عن HIV2. في هذه الدراسة ، تم تحديد حساسية نظام الاختبار بنسبة 99.8٪. أظهرت جميع أنظمة الاختبار التي تمت دراستها في المملكة المتحدة خصوصية تبلغ 99.7٪ أو أعلى. بمعنى آخر ، إذا تم فحص 1000 شخص ليس لديهم عدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، فإن 997 اختبارًا ستظهر النتيجة الصحيحة وفي ثلاث حالات فقط ستكون النتيجة إيجابية كاذبة. تم تحديد أن هذه النتيجة كانت خاطئة من خلال اختبار تأكيدي. [البحث - تحسين أداء مجموعات فحص فيروس نقص المناعة البشرية. المؤلف - Perry KR وآخرون ، 2008. منشور - Transfus Med 18: 228-240] عينة واحدة (من 669 اختبارًا) ووجد أنها تحتوي على حساسية 99.8٪. لم يتمكن نظاما اختبار Vidas Duo و Enzygnost Integral من الكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية 1 ، النوع الفرعي F و C. في فرنسا ، تمت مقارنة خصوصية أنظمة اختبار الجيل الرابع المستخدمة في نهاية القرن الماضي وتلك المنتجة الآن. إذا أظهرت الاختبارات التي تم إصدارها مسبقًا خصوصية من 99.4٪ إلى 99.6٪ ، فإن الاختبارات المستخدمة الآن أظهرت خصوصية من 99.8٪ إلى 100٪. [دراسة - هل يمكن أن تحل مقايسات مستضد p24 والأجسام المضادة المدمجة لفيروس HIV محل مقايسات مستضد p24 المحددة؟ المؤلف - Ly TD وآخرون ، 2007. منشور - طرق J Virol 143: 86-94] وفقًا لمنظمة الصحة العالمية ، أظهرت خمسة أنظمة اختبار أن كل منها لديه حساسية بنسبة 100٪ ، لكن تقييم الخصوصية كان مختلفًا. أظهر نظام الاختبار Genscreen Plus HIV Ag / Ab - خصوصية 98.3٪ ، Vironostika HIV Uni-Form II Ag / Ab - 99.0٪ ، مزيج Abott Murex HIV Ag / Ab - 99.3٪ ، Genedia HIV Ag-Ab - 99.7٪ ، Enzygnost HIV كان Integral II محددًا بنسبة 100٪ [دراسة - فحوصات فيروس نقص المناعة البشرية: الخصائص التشغيلية ، تقرير 15. المؤلف - منظمة الصحة العالمية ، قسم التقنيات الصحية الأساسية ، 2004. منشور - منظمة الصحة العالمية].بوابة AIDS.ru
عدوى فيروس نقص المناعة البشرية هي تشخيص خطير. يمكن أن تؤدي الأخطاء في التشخيص إلى عواقب وخيمة. تحليل ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو أكثر طرق البحث سهولة ، ولكنه ليس مفيدًا في جميع الحالات.
ELISA - مقايسة مناعية إنزيم. تتمثل مهمة طريقة ELISA في اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة في المواد البيولوجية. باستخدام الطريقة ، من الممكن تتبع التواجد في السائل ليس للفيروسات نفسها ، ولكن فقط للأجسام المضادة المنتجة استجابة لوجودها. يستخدم ELISA على نطاق واسع في تشخيص الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي. يساعد في تحديد الأمراض المنقولة جنسياً.
هناك عدة أنواع من ELISA: البديل المباشر ، البديل غير المباشر ، طريقة الساندويتش. في أي حال ، تعتمد التقنية على تحديد وجود الأجسام المضادة ، والتي تعمل كمؤشر لاختراق عامل أجنبي. للكشف عن هذه "العلامات" ، يتم معالجة المكون البيولوجي بالأنزيمات.
ELISA يكتشف الأجسام المضادة بدقة 96-98٪ ، الخطأ لا يكاد يذكر. 2-4٪.
ELISA - طريقة لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية
تحليل ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو المرحلة الأولى من التشخيص. مستضدات فيروس نقص المناعة هي البروتينات p24 و p15 و p17 و p31 والبروتينات السكرية gp 41 و gp55 و gp66 و gp120 و gp160.
للكشف عن البروتين الفيروسي ، يتم أخذ جزء من الدم من الوريد. يتم التعامل مع العينة المرسلة لفحص الدم ELISA بكواشف المقايسة المناعية الإنزيمية. المصل معزول عن الدم. إذا تم العثور عليها أثناء الدراسة ، فهذا يعني أن الفيروس موجود بالفعل في الدم.
يتم إعطاء الدم بدقة على معدة فارغة. قبل يومين من التحليل ، لا ينصح بتناول الأطعمة الدسمة وشرب الكحول. يجب التوقف عن تناول الأدوية المضادة للفيروسات في غضون 14 يومًا.
مزايا الطريقة:
- تكلفة منخفضة نسبيًا
- ثبات عالي في الكواشف.
- حساسية عالية
- مهلة قصيرة؛
- الحد الأدنى من تأثير العامل البشري.
يتم إنتاج أنظمة اختبار ELISA الحديثة وفقًا للمعايير العالمية. هذا يحسن دقة الطريقة.
ELISA لا تعطي دائمًا نتائج موثوقة. بعد دخول الفيروس إلى الدم ، تبدأ المرحلة الكامنة (الخفية) من التطور. الفترة التي تبدأ فيها الفيروسات في التكاثر ولم تتشكل الأجسام المضادة بعد تسمى "فترة النافذة المصليّة". لا جدوى من عمل ELISA في هذه المرحلة. إذا حدثت عدوى ، ستكون النتيجة. تعتمد سرعة اكتشاف الفيروس لنفسه على عدد الخلايا الخطرة التي دخلت الجسم. مع الجماع غير المحمي أو نقل الدم المصاب ، ستكون هذه الفترة ضئيلة.
من أجل الموثوقية العالية لـ ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية ، أجريت الدراسة ثلاث مرات. المواعيد النهائية لـ ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية:
- بعد 6 أسابيع من الاتصال المحتمل ،
- في 3 أشهر ،
- بعد ستة شهور.
الجيل الرابع من ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو الطريقة الأكثر إفادة في المراحل المبكرة من الإصابة. يمكن إجراؤها في وقت مبكر بعد شهر واحد من الإصابة المزعومة. الاختبار مكلف مقارنة بنظيره من الجيل الثالث. لذلك ، في المؤسسات الطبية العامة ، يتم استخدامه كطريقة تشخيص إضافية. يتم إجراء الاختبار 3 مجانًا ، إذا كان من المستحيل إعطاء إجابة واضحة بناءً على نتائجه ، يتم إرسال المريض للجيل الرابع من ELISA.
مهم!مباشرة بعد الإصابة ، يصبح الشخص معديا. إنه خطر على الآخرين ، حتى لو لم يعرف بعد عن تشخيصه!
إذا تم الكشف عن الأجسام المضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية أثناء ELISA ، فمن الضروري إجراء دراسات إضافية. إنه ينتمي إلى هؤلاء. موثوقية هذه الطريقة 80٪. بمساعدة PCR ، يتم فحص الدم والسائل المنوي والإفرازات المهبلية. ينقسم السائل البيولوجي في مفاعل طبي ، ثم يخضع للعلاج بالأنزيم. نتيجة لذلك ، يتم الحصول على بيانات حول تركيز خلايا فيروس نقص المناعة البشرية في وسط سائل. بسبب الخطأ الكبير (20٪) ، مع نتيجة إيجابية ، يتم إجراء النشاف المناعي بالإضافة إلى ذلك.
الخطوة التشخيصية التالية هي اختبار كومبو (أو النشاف المناعي). هذه دراسة حساسة للغاية (ثقة 98٪) ويجب إجراؤها إذا كانت نتائج ELISA غير حاسمة في 6 أشهر.
تفسير نتائج ELISA
وقت فك التشفير من 24 إلى 48 ساعة. إذا كان من الضروري الحصول على المعلومات بشكل عاجل (التدخل الجراحي مطلوب) ، يتم فك التشفير في غضون ساعتين. لا تحتوي المحطات الطبية الإقليمية دائمًا على الكواشف اللازمة. تؤخذ العينة في مكان الإعارة ثم تنقل إلى المركز الإقليمي. في ظل هذه الظروف ، يمكن معرفة النتيجة في غضون أسبوع إلى أسبوعين.
يمكن أن تكون نتيجة المقايسة المناعية للإنزيم موجبة أو سلبية ؛ ليس هناك من خيارات اخرى.
حتى لو كانت النتيجة إيجابية أثناء اختبار ELISA الأساسي والمتكرر ، فلا يمكن التعرف على المريض على أنه مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. خطأ محتمل. أسباب النتيجة الإيجابية الخاطئة:
- الأمراض المزمنة؛
- أمراض معدية طويلة الأمد
- حمل.
لذلك ، يجب توضيح نتيجة التحليل بدراسات إضافية.
إذا كان الشخص مصابًا بفيروس نقص المناعة البشرية أثناء التنظير المناعي لفيروس نقص المناعة البشرية (رد الفعل) ، مما يعني أنه يتمتع بصحة جيدة.
تتكيف خلايا الفيروس في النهاية مع الأدوية الموصوفة. للتحكم ، يتم تكرار اختبار ELISA بشكل دوري.
في بعض الأحيان يظهر التجلط المناعي نتيجة سلبية خاطئة. فيروس نقص المناعة نادر للغاية 6 أشهر (أو أكثر). هذا ممكن إذا دخلت كمية صغيرة من الخلايا الفيروسية إلى مجرى الدم. في 0.5٪ من العدد الإجمالي للحالات ، لا يمكن تشخيص العدوى إلا بعد عام. في 99.5 ٪ ، في غضون ستة أشهر بعد الإصابة ، ستعطي ELISA نتيجة موثوقة.
حتى مع الدراسات عالية الدقة ، لا يزال هناك هامش خطأ قدره 2٪. يجب ألا ننسى العامل البشري. للتخلص من احتمال الخطأ ، يمكن إجراء الاختبار في مؤسستين مختلفتين.
تعد دراسة عينات الدم باستخدام ELISA لعدوى فيروس العوز المناعي البشري واحدة من أولى طرق التشخيص وأكثرها موثوقية. إن المقايسة المناعية للإنزيم هي واحدة من الدراسات القليلة إلى جانب تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) التي ، مع درجة عالية من الاحتمال ، تؤكد أو تدحض مثل هذا التشخيص الرهيب مثل الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية أو الإيدز. منذ اكتشاف أولى حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة في الاتحاد السوفيتي وهذا عام 1983. لم يتم اختراع دواء من شأنه أن يعالج هذه العدوى تمامًا ، وكذلك لقاح لها ، لكن هذه العملية قيد التطوير النشط. في غضون ذلك ، يسمح لك التشخيص المبكر فقط لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية بالحفاظ على العملية المرضية تحت السيطرة.
رحلة معلومات حول الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية
فيروس نقص المناعة البشرية هو فيروسات قهقرية تسبب مسارًا بطيئًا للمرض. يتغلغل فيروس نقص المناعة في الجسم ويؤثر بشكل أساسي على الأنسجة اللمفاوية. تنتج المناعة الصحية الخلايا اللمفاوية التائية من أجل التعرف على العامل الفيروسي الجديد. ثم أعط معلومات عن الأجسام المضادة ، من خلال ما هي العلامات للتعرف على فيروس نقص المناعة والقضاء عليه. تحدث عملية "التعرف" على فيروس نقص المناعة بمساعدة بروتينات مستقبلات CD4. لكن في هذه المرحلة بالتحديد ، يتم ملاحظة شيء غريب ، وهو الشيء الذي لم يسمح لنا لسنوات عديدة بهزيمة وباء القرن العشرين.
تلامس خلية المناعة CD4 فيروس نقص المناعة للتعرف على العامل الأجنبي. في هذه اللحظة ، يرتبط فيروس نقص المناعة بغشاء الخلايا الليمفاوية ، ثم يندمج مع غلاف المستقبل ويدخل كبسولة بمعلوماتها الجينية وبروتينات فيروسية محددة في الخلية المناعية. والخلية ، المرسلة إلى حساب فيروس نقص المناعة ، من الآن فصاعدًا تصاب بالعدوى. لكن كل شيء يحدث ، للأسف ، ليس بخلية واحدة ، ولكن على نطاق واسع جدًا. ينتج جهاز المناعة البشري ، استجابة للخلايا "السابقة" والمصابة الآن ، أجسامًا مضادة جديدة. لكن فيروسات نقص المناعة ، وفقًا للمخطط الموصوف سابقًا ، تلتقط الخلايا المدافعة مرارًا وتكرارًا.
وبالتالي ، فإن المناعة البشرية تقع في حلقة مفرغة. الطريقة الوحيدة لمساعدة الجسم هي إجراء عدوى عالية النشاط بمضادات الفيروسات القهقرية (HAART). وكذلك التحول إلى نمط حياة وتغذية صحية تمامًا ، مما سيحرر موارد مناعة كبيرة من العمل غير الضروري. توحد العلماء في جميع أنحاء العالم ويجرون باستمرار أبحاثًا بحثًا عن علاج فعال لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية.
منذ وقت ليس ببعيد ، تم إجراء تجربة باستخدام بروتين CCR5 ، الذي يوفر المناعة الفطرية للكائن الحي لجزء معين من الأشخاص للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. أخضع العلماء مادة دم متطوعين من البشر للعلاج الجيني لإدخال CCR5 في الخلايا التائية المساعدة. وقد أدى ذلك في جميع المرضى إلى انخفاض هائل في عدد الحمض النووي للفيروسات القهقرية. وفي مريض واحد ، تم القضاء على فيروس نقص المناعة تمامًا بهذه الطريقة. على أساس هذه التجربة ، لا يزال بإمكان المرء أن يفترض في حالة واحدة فقط انتصارًا ناجحًا على الطاعون الرهيب في القرن العشرين.
منذ عام 2016 ، تقدم هذا النشاط إلى الأمام بشكل ملحوظ. تم الحصول على نتائج مذهلة لتدمير تسعين بالمائة من فيروس نقص المناعة بمساعدة الأجسام المضادة التي تفرزها الأنسجة العضلية ، متجاوزة المناعة المكتسبة. للقيام بذلك ، تم زرع جين خاص في الأنسجة العضلية للكائنات الحية التجريبية ، مما ينتج عنه نفس الخلايا القاتلة لتدمير عدوى فيروس نقص المناعة البشرية. لكن هذه الطريقة لم تستخدم بعد في البشر ، على الرغم من التخطيط لها في السنوات القادمة.
علاوة على ذلك ، ليس من المنطقي أن تفقد القلب. ومن الأفضل التعرف على فيروس نقص المناعة في أقرب وقت ممكن ، والذي يمكن القيام به بمساعدة ELISA إذا كان هناك خطر الإصابة. وإذا تم تأكيد التشخيص ، حافظ على مناعتك من خلال HAART حتى يتم الإعلان عن علاج جديد لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية.
تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية
تهدف طريقة ELISA لعدوى فيروس العوز المناعي البشري إلى اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة في عينة دم بشري. بمجرد دخول الجسم ، لا تبدأ الفيروسات القهقرية ، والتي تشمل عدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، على الفور في التقاط الخلايا المناعية CD4 (الخلايا اللمفاوية التائية). لكن يجب ألا تنتظر حتى تبدأ العوامل العدوانية نشاطًا مميتًا في الجسم. لا يخفى على أحد أنه بالنسبة لأي مرض ، والإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ليست استثناءً ، فكلما بدأ العلاج مبكرًا ، كان العلاج أكثر فعالية.
عندما يتعلق الأمر بفيروس نقص المناعة البشرية ، لم يتم تسجيل حالات الشفاء التام رسميًا. لكن هذا لا يعني على الإطلاق أنك بحاجة إلى الاستسلام وترك المرض يأخذ مجراه. يعيش الأشخاص المصابون بعدوى فيروس العوز المناعي البشري حتى 75-80 عامًا ، بشرط أن يتم اكتشافهم في المرحلة الأولية وأن يخضعوا لعلاج مستمر.
طريقة المقايسة المناعية الإنزيمية لتشخيص عدوى فيروس العوز المناعي البشري موثوقية عالية تبلغ حوالي 97-99٪. لكن هذا الجزء الصغير من 1-3٪ هو الذي يمكن أن يعطي نتيجة إيجابية أو سلبية كاذبة في تشخيص عدوى فيروس العوز المناعي البشري باستخدام ELISA. لهذه الأغراض ، من أجل تأكيد أو دحض مؤشرات المقايسة المناعية للإنزيم بشكل نهائي ، يتم استخدام تحليل يسمى immunoblot (IB).
ما هي طرق ELISA و IB لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية
لا تهدف المقايسة المناعية الإنزيمية للجيل الرابع من عدوى فيروس العوز المناعي البشري إلى البحث عن الخلايا المسببة للأمراض وتحديدها فحسب ، بل تهدف أيضًا إلى تحديد عددها. لذلك ، يجمع المقايسة المناعية للأنزيم بين الاختبار النوعي والكمي. ستظهر طريقة الجيل الرابع من ELISA لعدوى فيروس العوز المناعي البشري لمدة ستة أسابيع من لحظة الإصابة المفترضة موثوقية عالية بنسبة 100٪ للنتائج.
تعتمد المقايسة المناعية للإنزيم على تفاعل الأجسام المضادة المحددة والمستضدات ذات الصلة. بفضل إنزيم خاص ، يتم تكوين تركيبة "الجسم المضاد - المستضد". لإجراء هذا التفاعل للكشف عن الغلوبولين المناعي لعدوى فيروس العوز المناعي البشري ، يتم وضع عينة دم في لوح بوليسترين يحتوي على 96 بئراً ، حيث تكون البروتينات المؤتلفة في صورة صلبة (ممتصة). تتعرف المستضدات أو الأجسام المضادة الموجودة في الحاوية مع مصل الدم على الكائن المعروف لها وتشكل مركب "AT-AG" معه. لإنشاء أجسام مضادة لفيروسات نقص المناعة من النوع 1 و 2 ، يتم أيضًا استخدام اختبار DS IFF لـ HIV AG-AT.
مزايا طريقة ELISA لعدوى HIV من الجيل الرابع:
- موثوقية عالية ، أكثر من 96٪. غالبًا ما لا تكون النتائج الخاطئة ناتجة عن التحليل نفسه ، ولكن بسبب الإعداد غير السليم أو مرض الجهاز التنفسي الحديث.
- تحديد وجود ووفرة الغلوبولين المناعي.
- القدرة على تتبع نتيجة علاج فيروس نقص المناعة البشرية.
- سرعة الحصول على نتائج فحص فيروس نقص المناعة البشرية ، وهي عدة ساعات ، إذا تم إجراؤها في مركز التشخيص.
- يعد تحليل عدوى فيروس العوز المناعي البشري الرابع ، الذي يكون تفاعل المقايسة المناعية للإنزيم فيه أعلى بكثير من سابقاته ، مفيدًا خلال النافذة المصلية لفيروس نقص المناعة.
التجلط المناعي هو فحص ويتم إجراؤه لتحديد نوع المستضد. تُستخدم دراسة تحري الـ IB كاختبار تحقق من عدوى فيروس العوز المناعي البشري بعد 5-7 أسابيع من اختبار ELISA. تعتمد طريقة IB على استخدام الرحلان الكهربائي لفصل مستضدات فيروسات نقص المناعة. تجعل عملية فصل المستضدات من الممكن اكتشاف الغلوبولين المناعي المحدد لكل مستضد محدد لعدوى فيروس العوز المناعي البشري.
يُستخدم التجلط المناعي عندما يُظهر اختبار المقايسة المناعية الإنزيمية لعدوى فيروس العوز المناعي البشري نتيجة إيجابية أو سلبية خاطئة مرتين على التوالي. قد ينشأ الشك في غياب الأعراض المميزة لعدوى فيروس العوز المناعي البشري أو على العكس من ذلك. على الرغم من أنه قد يكون هناك اختلافات مختلفة هنا أيضًا.
تفسير نتائج ELISA لعدوى فيروس العوز المناعي البشري
في حالة تأكيد فحص ELISA plus على أنه إيجابي ، فلا شك أن المريض يعاني من فيروس نقص المناعة في الجسم. ولكن إذا كان IFF ، على سبيل المثال ، إيجابيًا لفيروس نقص المناعة البشرية ، وكانت الطعنة المناعية سلبية ، فإنهم يستنتجون أن العدوى "ناقصة" ، أي أنها غائبة.
فقط في مثل هذه الحالة ، لا يزال يتم إرسال المريض لإجراء فحص إضافي من أجل استبعاد فيروس نقص المناعة بشكل مؤكد.
ومع مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم لفيروس نقص المناعة البشرية من الجيل الرابع "ناقص" ، والتكتل المناعي الإيجابي ، من الممكن وجود عدوى أخرى في الجسم. من الممكن أن يكون الشخص مصابًا بمرض مناعي ذاتي ، أو عملية أورام ، أو أحيانًا الصدفية في الجلد أو المفاصل تعطي نتائج إيجابية خاطئة لكل من ELISA و IB.
خيار آخر ، عندما يُظهر اختبار المقايسة المناعية للإنزيم لعدوى فيروس العوز المناعي البشري نتيجة "ناقص" ولطمة مناعية أيضًا بقيمة "ناقصة" ، يمكن للمرء أن يفرح هنا فقط بسبب غياب فيروس نقص المناعة. ولكن إذا كانت هناك علامات محددة متأصلة في الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية أو إذا كان الشخص على اتصال وثيق بمريض مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. بعد ذلك سيكون من الضروري أيضًا إجراء تشخيصات إضافية ، على سبيل المثال ، تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR). بالإضافة إلى ذلك ، مع وجود مؤشرات مشكوك فيها "ناقص" أو "زائد" ، ينصح المريض باستعادة الدم بعد 4 ، ويفضل 6 أشهر.
المعيار والانحراف في عدد الخلايا اللمفاوية التائية في الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية:
- يتراوح معدل الخلايا التائية من 1000 إلى 2900 ميكرولتر.
- الإيدز في وقت مبكر من 500 إلى 200 ميكرولتر.
- الإيدز متأخر أقل من 200 ميكرولتر.
إن الوقاية من المرض أسهل من العلاج - هذه كلها حكمة معروفة. منذ انتشار الأخلاق الحرة في المجتمع ، ظهر عدد كبير من الأمراض التناسلية المختلفة. لا تزال عدوى فيروس نقص المناعة البشرية والإيدز تصنف على أنها أمراض مستعصية. طريقة انتقال العدوى هي بشكل رئيسي عن طريق الاتصال الجنسي وعن طريق الدم. من المستحيل حماية مائة بالمائة من مرض واحد. هناك العديد من المواقف غير المتوقعة ، حتى بالنسبة للأشخاص الذين يعيشون حياة أخلاقية ونظيفة. في حالة زيادة خطر الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية وغيره من الأمراض الخطيرة ، فإن تشخيص الدم لا يقدر بثمن.
في تواصل مع
في معظم المرضى ، يتم اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد 6-12 أسبوعًا من الإصابة باستخدام أنظمة اختبار الجيل الأول و3-4 أسابيع باستخدام أنظمة اختبار الجيل الثالث التي تعمل على مبدأ ساندويتش ELISA مع مستضدين. ومع ذلك ، يتم الكشف عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في وقت مبكر بعد أسبوعين من العدوى عن طريق تحليل مستضد p24 وبعد أسبوع واحد عن طريق تحليل الحمض النووي الريبي الفيروسي. بمعنى آخر ، يمكن تقليل فترة النافذة إلى أسبوعين أو أكثر باتباع نهج تشخيصي شامل. يظهر مستضد p24 قفيصة في الدم أثناء التكاثر الفيروسي السريع في مرحلة الحمى الحادة لعدوى فيروس العوز المناعي البشري ويمكن اكتشافه بسهولة خلال هذه الفترة باستخدام ELISA بسيط ورخيص نسبيًا.
إذا كانت المهمة هي تحديد جميع الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية ، بما في ذلك أولئك الذين يعانون من المراحل المبكرة من العدوى ، فمن الضروري استخدام ترسانة الاختبارات الكاملة: للأجسام المضادة ، والمستضدات ، والحمض النووي الريبي. ومع ذلك ، فإن اختبار الحمض النووي الريبي الفيروسي مكلف ، ويتطلب عمالة مكثفة ، وبعيدًا عن متناول معظم المختبرات. ومع ذلك ، فإن تلك المختبرات التي تحتوي على أجهزة ELISA قادرة على اكتشاف معظم حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، بشرط اختبار العينات لكل من الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ومستضد p24.
في أواخر التسعينيات كانت هناك أنظمة اختبار لـ ELISA الموازية للأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ومستضد p24 ، مما ألغى الحاجة إلى اختبارات منفصلة. تم تطوير جيل جديد من أنظمة الاختبار المشتركة للكشف المتزامن عن الأجسام المضادة لمستضدات فيروس العوز المناعي البشري وفيروس نقص المناعة البشرية ويتم تنفيذه.
تتمثل ميزة التحليلات المجمعة في أنها تستغرق وقتًا أقل وتتطلب عمالة أقل وتكون أكثر فعالية من حيث التكلفة من التحليلات المنفصلة. تتمتع أنظمة الاختبار المجمعة بحساسية تحليلية عالية بسبب استخدام شطيرة ELISA مع مستضدين للكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ، وكذلك بسبب الاكتشاف المتزامن لمستضد p24.
يوجد حاليًا 8 أنظمة اختبار مجمعة من الجيل الرابع في السوق اجتازت التجارب السريرية: VIDAS HIV DUO Ultra (bioMérieux ؛ Marcy-l'Etoile ، فرنسا) ؛ كومبي Enzymun-Test-HIV-HIV (Boehringer ؛ مانهايم ، ألمانيا) ؛ Vironostika HIV Uni-Form II Ag / AB (Organon Teknika ؛ Boxtel ، هولندا) ؛ AxSYM-HIV Ag / AB (مختبرات أبوت ، أبوت بارك ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية) ؛ Enzygnost HIV Integral (Dade Behring؛ Marburg، Germany) ؛ Genescreen Plus HIV Ag-AB (Bio-Rad) و COBAS Core HIV Combi (Roche Diagnostics ؛ مانهايم ، ألمانيا) ؛ كومبي Elecsys-HIV (Boehringer ؛ مانهايم ، ألمانيا). استخدم نظام الاختبار الأخير طريقة شطيرة كهرو كيميائية مع مستضدين ؛ يستغرق التحليل 18 دقيقة ؛ تبلغ الخصوصية وفقًا لاختبارات المرضى المقيمين في المستشفى 99.8٪. يتيح لك نظام الاختبار هذا تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية قبل 5 أيام من أكثر أنظمة الاختبار حساسية للأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية. يوجد جسم مضاد آخر غير محدد العلامات و p24 ELISA بحساسية 99.5٪ وخصوصية 94.8٪.
اختبار الأجسام المضادة والمستضد المشترك لعدوى فيروس العوز المناعي البشري الحديثة وطويلة الأمد له ما يبرره ليس فقط في اختبار المتبرعين بالدم ، ولكن أيضًا في العديد من البيئات السريرية. يسمح التشخيص المبكر لعدوى فيروس العوز المناعي البشري عن طريق الكشف عن مستضد p24 بالبدء الفوري في العلاج وإرشاد المريض واتخاذ تدابير للحد من مخاطر الانتقال. نظرًا للقدرة على اكتشاف مستضد p24 ، فإن أنظمة اختبار الجيل الرابع تجعل من الممكن تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في مرحلة مبكرة. تعد أنظمة الاختبار هذه مفيدة جدًا لتشخيص عدوى فيروس نقص المناعة البشرية الحديثة وطويلة الأجل في المستشفيات والمختبرات السريرية المستقلة ومراكز التشخيص (العامة والتجارية على حد سواء). غالبًا ما يلجأ المرضى إلى مثل هذه المؤسسات ، حيث يكون خطر الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية أعلى بكثير من المتبرعين بالدم. للكشف المبكر عن عدوى فيروس العوز المناعي البشري في مثل هؤلاء المرضى ، يلزم وجود أنظمة اختبار ذات حساسية تحليلية عالية.
من المهم أن نلاحظ أن الحساسية التحليلية والوبائية العالية لمعظم أنظمة اختبار الجيل الرابع ، والتي أثبتت فعاليتها في الاختبارات التي أجريت على مرضى من مجموعات سكانية مختلفة ، والمرضى الذين يعانون من الانقلاب المصلي والمرضى الذين يعانون من أنواع فرعية مختلفة من فيروس نقص المناعة البشرية ، تجعل أنظمة الاختبار هذه لا غنى عنها لتشخيص كلا النوعين الحديثين. وعدوى فيروس نقص المناعة البشرية على المدى الطويل في مجموعة متنوعة من الحالات. على سبيل المثال ، في المختبرات السريرية لمؤسسات الرعاية الصحية في الميزانية ، لا يتم عادةً إجراء اختبار الدم لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية (هذا من اختصاص محطات نقل الدم) ، وبالتالي ، قد يتم تفويت حالات العدوى الحديثة في الاختبار القياسي للأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية. . لقد ثبت أن اكتشاف العدوى في مرحلة مبكرة يوفر أساسًا لبدء العلاج المضاد للفيروسات القهقرية في الوقت المناسب ، مما يزيد من فعاليته. بالإضافة إلى ذلك ، يصبح من الممكن استشارة المريض في الوقت المناسب ، وتنظيم إدارته بشكل صحيح ومنع انتقال عدوى فيروس نقص المناعة البشرية.
الاختبارات السريعة:هذه فئة من أنظمة الاختبار تعطي نتائج أسرع من 30 دقيقة. ظهرت اختبارات سريعة للكشف عن أجسام مضادة معينة لفيروس نقص المناعة البشرية في أواخر الثمانينيات وأوائل التسعينيات. اكتسب شعبية. بفضل تحسين تكنولوجيا الإنتاج ، أصبحت الاختبارات السريعة لا تقل دقة عن ELISA (بشرط أن يتم إجراء التحليل بعناية من قبل موظف مؤهل). ومع ذلك ، نظرًا للبساطة الخيالية للاختبارات السريعة ، غالبًا ما يرتكب الموظفون أخطاء. على سبيل المثال ، عند إضافة الكواشف ، لا يتم دائمًا وضع الماصات عموديًا (كما هو موضح في التعليمات) ، مما ينتهك نسبة أحجام الكاشف. مصدر آخر للخطأ هو ميل العديد من الفنيين لتحليل عينات متعددة في نفس الوقت. لهذا السبب ، لا يتم الحفاظ على وقت خطوات التحليل.
عند إجرائها بشكل صحيح ، توفر اختبارات الأجسام المضادة السريعة لفيروس نقص المناعة البشرية نتائج موثوقة ويمكن استخدامها في مجموعة متنوعة من أماكن الرعاية الصحية والبيئات السريرية. على وجه الخصوص ، يتم استخدامها في أقسام الطوارئ ، ومكاتب الأطباء ، والعيادات الخارجية ، وأقسام علم الأمراض ، والمشارح ، ونقاط نقل الدم ، وحيثما يلزم إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية العاجل (على سبيل المثال ، بعد الاتصال بعامل طبي مع وجود مصدر محتمل للعدوى) .
لا غنى عن اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية السريعة لاختبار النساء في المخاض اللائي لم يتلقين رعاية ما قبل الولادة (أي النساء في المخاض مع حالة فيروس نقص المناعة البشرية غير المحددة). لقد ثبت أن العلاج المضاد للفيروسات القهقرية (على وجه الخصوص ، زيدوفودين) يقلل بشكل فعال من خطر الانتقال الرأسي لفيروس نقص المناعة البشرية وأن هذا العلاج ضروري في أسرع وقت ممكن للأم ، ثم لحديثي الولادة. يسمح الاختبار السريع للمرأة الحامل لفيروس نقص المناعة البشرية في فترة ما قبل الولادة ، إذا تم الكشف عن الأجسام المضادة ، ببدء العلاج قبل الولادة.
وصف
تمرين
دواعي الإستعمال
تفسير النتائج
وصف
طريقة التحديد المقايسة المناعية الإنزيمية (ELISA).
المواد قيد الدراسةمصل
زيارة منزلية متاحة
الجمع بين الكشف عن الأجسام المضادة لأنواع فيروس نقص المناعة البشرية 1 و 2 ومستضد فيروس نقص المناعة البشرية p24 ، اختبار نوعي.
انتباه. في حالة وجود ردود فعل إيجابية ومشكوك فيها ، يمكن تمديد فترة إصدار النتيجة حتى 10 أيام عمل. فيروس نقص المناعة البشرية (فيروس نقص المناعة البشرية) ، الذي يسبب الإيدز (متلازمة نقص المناعة المكتسب) ، ينتمي إلى عائلة الفيروسات القهقرية. ينتقل من شخص لآخر من خلال استخدام الإبر والمحاقن الملوثة لتعاطي المخدرات عن طريق الوريد أو الإجراءات العلاجية ، من خلال الاتصال الجنسي ، سواء من جنسين مختلفين أو مثليين. يمكن أن يحدث انتقال الفيروس من خلال نقل الدم المصاب ومشتقاته ، والتبرع بالأعضاء أو السائل المنوي ، وفي العاملين في مجال الرعاية الصحية عند إصابتهم بالإبر أو الأدوات المصابة. عدوى فيروس العوز المناعي البشري ممكنة من خلال انتقاله من الأم المصابة إلى الطفل (الطريق الرأسي) ، على الرغم من أن الطرق الحديثة للوقاية باستخدام العلاج المضاد للفيروسات القهقرية ، إذا تم اتباع جميع التوصيات ، يمكن أن تقلل من هذا الخطر إلى الحد الأدنى.
تتضمن عملية تفاعل الفيروس مع الخلية عددًا من المراحل: ارتباط الفيروس بالخلية ، وإطلاقه من الغلاف ، والاختراق في السيتوبلازم ، وتكوين الحمض النووي من الحمض النووي الريبي الفيروسي ، ودمج الحمض النووي الفيروسي في الجينوم من الخلية المضيفة. بعد ذلك تبدأ المرحلة الكامنة من العدوى. في هذه الحالة ، يمكن أن يوجد الحمض النووي المؤهل لبعض الوقت دون إظهار النشاط ودون التأثير على النشاط الحيوي للخلية المضيفة. طالما لا يوجد تعبير عن البروتينات الفيروسية ، فلا توجد استجابة مناعية للفيروس. تظهر الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ، والتي تميز الاستجابة المناعية للجسم ، بعد تنشيط الحمض النووي الفيروسي وبدء التكاثر النشط للفيروس. تعتمد مدة الفترة الكامنة على عدد من العوامل ، بما في ذلك الخصائص الجينية الفردية للكائن الحي.
قد تظهر الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بدءًا من الأسبوع الثاني بعد الإصابة ؛ يزيد محتواها في غضون 2-4 أسابيع ويستمر لسنوات عديدة. في 90-95٪ من المصابين ، يظهرون في الأشهر الثلاثة الأولى بعد الإصابة ، في 5-9٪ - في الفترة من ثلاثة إلى ستة أشهر ، في 0.5-1٪ - في وقت لاحق.
في الأسابيع الأولى من الإصابة ، حتى قبل ظهور الأجسام المضادة للفيروس (أي قبل الانقلاب المصلي) ، يمكن اكتشاف وجود مستضدات فيروس نقص المناعة البشرية ، بما في ذلك بروتين القفيصة p24 ، في عينات المصل أو البلازما. في وقت لاحق ، بعد الانقلاب المصلي ، عادة ما يصبح غير قابل للكشف.
تكتشف فحوصات الجيل الرابع المركبة ، مثل اختبار HIV Ag / Ab Combo (المهندس المعماري ، أبوت) ، كلاً من الأجسام المضادة من النوع الأول والنوع الثاني من فيروس العوز المناعي البشري ومستضد فيروس العوز المناعي البشري p24 ، مما يسمح بالكشف المبكر عن العدوى. تشمل الخصائص الخاصة لاختبار الفحص المستخدم في مختبر INVITRO للكشف عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، النوعية العالية للدراسة (> 99.5٪) ؛ 100٪ حساسية الفحص للأجسام المضادة المميزة لفترة الانقلاب المصلي ، وحساسية الاختبار لمستضد p24 حوالي 18 بيكوغرام / مل.
يخضع إجراء الاختبارات المعملية لفيروس نقص المناعة البشرية لتنظيم صارم بأوامر وزارة الصحة في الاتحاد الروسي ويتضمن مرحلة فحص (فحص) دراسة لوجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية عن طريق طرق المقايسة المناعية الإنزيمية (ELISA) المعتمدة للاستخدام ، ومرحلة التحقق (التأكيد) دراسة أكثر تفصيلاً في معمل مركز الإيدز بالمدينة. وتجدر الإشارة إلى أنه حتى أفضل أنظمة فحص ELISA لا تضمن خصوصية بنسبة 100٪ ، أي أن هناك بعض الاحتمالية للحصول على نتائج إيجابية خاطئة غير محددة مرتبطة بخصائص مصل دم المريض. لذلك ، قد لا يتم تأكيد نتيجة فحص ELISA الإيجابية في الاختبارات المؤكدة ، وبعد ذلك سيتم إعطاء المريض نتيجة سلبية أو غير محددة. إذا كانت نتيجة الدراسة التأكيدية غير محددة ، فيجب تكرار الاختبار في الديناميات في غضون 2-3 أسابيع.
التشخيص المختبري لعدوى فيروس العوز المناعي البشري لدى الأطفال المولودين لأمهات مصابات بفيروس نقص المناعة البشرية له خصائصه الخاصة. يمكن للأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية (فئة IgG) أن تنتشر في الدم حتى 18 شهرًا من لحظة الولادة. لا يعني عدم وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية عند الأطفال حديثي الولادة أن الفيروس لم يعبر حاجز المشيمة. يخضع أطفال الأمهات المصابات بفيروس نقص المناعة البشرية لفحص تشخيصي مخبري في غضون 36 شهرًا بعد الولادة.
تمرين
إعداد خاص غير مطلوب. يوصى بأخذ عينات الدم في موعد لا يتجاوز 4 ساعات بعد الوجبة الأخيرة. يمكن العثور على توصيات عامة للتحضير للبحث. يُنصح بإجراء اختبار للكشف عن المستضد والأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في موعد لا يتجاوز أسبوعين بعد الإصابة المحتملة ، وتكراره بعد ثلاثة وستة أسابيع في حالة وجود نتيجة سلبية. يتم تسجيل طلبات البحث في INVITRO LLC وفقًا لجواز السفر أو وثيقة تحل محلها (بطاقة الهجرة ، التسجيل المؤقت في مكان الإقامة ، شهادة الخدمة ، شهادة من مكتب الجوازات في حالة فقدان جواز السفر ، بطاقة التسجيل من فندق). يجب أن يحتوي المستند المقدم على معلومات حول التسجيل المؤقت أو الدائم في أراضي الاتحاد الروسي وصورة. في حالة عدم وجود جواز سفر (وثيقة تحل محله) ، يحق للمريض تقديم طلب مجهول لتوصيل المواد الحيوية. من خلال الفحص المجهول ، يتم تعيين التطبيق وعينة المواد الحيوية المستلمة من العميل برقم معروف فقط للمريض والطاقم الطبي الذي قدم الطلب. ! لا يمكن تقديم نتائج الدراسات التي يتم إجراؤها بشكل مجهول للاستشفاء ، والامتحانات المهنية ، ولا تخضع للتسجيل في ORUIB.
مؤشرات للتعيين
- تضخم الغدد الليمفاوية في أكثر من منطقتين.
- قلة الكريات البيض مع اللمفاويات.
- تعرق ليلي.
- فقدان الوزن المفاجئ لسبب غير معروف.
- الإسهال لأكثر من ثلاثة أسابيع لسبب غير معروف.
- حمى مجهولة السبب.
- التخطيط للحمل.
- التحضير قبل الجراحة ، الاستشفاء.
- تحديد الالتهابات التالية أو مجموعاتها: السل ، داء المقوسات الظاهر ، عدوى فيروس الهربس المتكرر في كثير من الأحيان ، داء المبيضات للأعضاء الداخلية ، التهاب العصب النطاقي المتكرر ، الالتهاب الرئوي الناجم عن الميكوبلازما ، المتكيسات الرئوية أو الليجيونيلا.
- ساركوما كابوزي في سن مبكرة.
- الجنس العرضي.
تفسير النتائج
يحتوي تفسير نتائج الاختبار على معلومات للطبيب المعالج وليس تشخيصًا. لا ينبغي استخدام المعلومات الواردة في هذا القسم للتشخيص الذاتي أو العلاج الذاتي. يتم إجراء تشخيص دقيق من قبل الطبيب ، باستخدام كل من نتائج هذا الفحص والمعلومات الضرورية من مصادر أخرى: التاريخ ، ونتائج الفحوصات الأخرى ، وما إلى ذلك.
وحدات القياس في المختبر المستقل INVITRO: اختبار نوعي. شكل عرض النتائج: في غياب الأجسام المضادة لـ HIV 1 و 2 ومستضد p24 ، تكون الإجابة "سلبية". في حالة الكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية أو المستضد في اختبار فحص ELISA ، يتم إرسال عينة المصل للتحليل بواسطة طريقة طقطقة مناعية مؤكدة إلى مركز الإيدز في المدينة ، والتي تتحقق من النتائج الإيجابية وغير المحددة.
نتيجة ايجابية:
- عدوى فيروس نقص المناعة البشرية؛
- نتيجة إيجابية خاطئة تتطلب دراسات متكررة أو إضافية *) ؛
- الدراسة ليست مفيدة في الأطفال الذين تقل أعمارهم عن 18 شهرًا المولودين لأمهات مصابات بفيروس نقص المناعة البشرية.
* تقدر الشركة المصنعة للكواشف أن خصوصية نظام اختبار فحص الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية 1 و 2 ومستضد فيروس نقص المناعة البشرية 1 و 2 (HIV Ag / Ab Combo ، Abbott) تبلغ حوالي 99.6٪ في كل من عامة السكان وفي المجموعة. المرضى الذين يعانون من تداخلات محتملة (العدوى HBV ، HCV ، الحصبة الألمانية ، HAV ، EBV ، HNLV-I ، HTLV-II ، الإشريكية القولونية ، Chl.trach ، إلخ ، أمراض المناعة الذاتية (بما في ذلك التهاب المفاصل الروماتويدي ، وجود الأجسام المضادة للنواة) ، الحمل ، مستويات مرتفعة من IgG ، IgM ، اعتلال أحادي النسيلة ، غسيل الكلى ، عمليات نقل الدم المتعددة).